人类免疫缺陷病毒-1型负向调节因子多肽特异性CD4+T淋巴细胞克隆的建立和筛选
Chinese Journal of Infectious Diseases（2015）
Abstract
目的 建立和筛选慢性HIV感染者体内HIV-1型负向调节因子(Nef)多肽特异性CD4+T淋巴细胞克隆.方法 采集5例无症状期HIV感染者PBMC,Bulk培养,用Nef蛋白C末端的Nef末端多肽刺激,双荧光流式细胞术分析细胞表面CD4分子和细胞内γ干扰素表达.有限稀释法进行Nef末端多肽特异性CD4+T淋巴细胞克隆,酶联免疫斑点法(ELISPOT)筛选特异性克隆,挑选生长最好的细胞扩大培养,完成克隆.结果 1例H1V感染者的PBMC中存在特异性CD4+T淋巴细胞,成功建立T淋巴细胞克隆.经ELISPOT法确认为Nef末端多肽特异性CD4+T淋巴细胞克隆.人白细胞抗原(HLA)-DRB1分型检测,提示该多肽表位可能为HLA-DRB1* 0406限制性.结论 成功建立Nef末端多肽特异性CD4+T淋巴细胞克隆,发现并鉴定了Nef末端表位及其HLA限制性.
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Key words
HIV-1,Negative regulation factor peptide,CD4+ T cell clone
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