大鼠肝脏缺血再灌注损伤中番茄红素的作用及对自噬的影响

目的 探讨番茄红素在大鼠肝脏缺血再灌注损伤中的作用及对自噬的影响.方法 将扬州大学动物实验室提供的80只SPF级雄性SD大鼠通过随机数字法分为4组:假手术组:大鼠麻醉后仅上腹部正中纵行切口进腹腔,分离肝门后即缝合关腹;治疗组:造模后予以番茄红素(10 mg/kg)溶解于药用玉米油中(2 ml/kg),采取腹腔注射的方法,于手术60 min前注入;对照组:造模后予腹腔注射与治疗组等体积的0.9％氯化钠溶液;抑制组:造模后予以番茄红素(10 mg/kg)+3-甲基腺嘌(3-ma) (15 mg/kg)也以相同注射方式注射腹腔内.每组各20只.对照组、治疗组、抑制组分别于缺血再灌注后1、6、12、24 h予以取材检测各项生化指标,假手术组也各取相同时间点.检测各组大鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST),运用双抗体夹心ELISA法测定相关细胞炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6),Western blotting检测肝脏组织中Beclin-1;通过苏木精-伊红染色观察各组肝脏组织病理学改变.计量资料以均数±标准差(Mean±SD)表示,两组间比较采用独立样本t检验,多组间均数比较采用单因素方差分析和Newman-Keuls方法.结果 假手术组1、6、12、24 h的血清ALT分别为(39.81±13.54)、(39.65±14.24)、(39.61±13.68)、(38.72±12.85) U/L,对照组1、6、12、24h的血清ALT分别为(128.43±33.49)、(637.26 ±89.53)、(289.76±43.59)、(124.26 ±35.32) U/L,对照组与假手术组相比,血清ALT在1、6、12、24h均显著升高(P＜0.05).治疗组1、6、12、24 h的血清ALT分别为(73.26 ±23.24)、(419.27 ±56.49)、(196.23±26.23)、(79.76±20.43) U/L,与对照组相比,治疗组的血清ALT水平在1、6、12、24h均显著降低(P＜0.05).抑制组1、6、12、24h的血清ALT分别为(142.59 ±42.86)、(592.45±48.36)、(268.23±42.36)、(131.23 ±24.36) U/L,与治疗组相比,抑制组的血清ALT水平在1、6、12、24h均显著升高(P＜0.05).治疗组缺血再灌注后1、6、12、24h,血清AST水平显著低于缺血再灌组(P＜0.05).番茄红素降低了缺血再灌注后1、6、12、24h细胞炎性因子TNF-α和IL-6的表达(P＜0.05).苏木精-伊红染色光镜下观察治疗组较对照组肝细胞损伤情况明显减轻.番茄红素可以促进缺血再灌注大鼠肝脏自噬相关蛋白Beclin-1的表达的上升.抑制自噬的药物3-ma具有对抗番茄红素降低Beclin-1表达的效应.结论 番茄红素预处理可通过促进肝细胞自噬保护肝脏缺血后再灌注损伤.