肺腺癌组织中miR-206的表达及其对肺腺癌细胞迁移侵袭的影响

Chinese Journal of Thoracic and Cardiovaescular Surgery(2016)

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摘要
目的:研究miR-206在人肺腺癌组织中的表达情况,探讨miR-206是否通过下调SOX4影响肺腺癌细胞系( A549)细胞的侵袭。方法收集94例肺腺癌组织标本及癌旁正常肺组织,通过实时荧光定量PCR( RT-PCR)检测各组组织中与肺腺癌相关的miR-206、miR-21、miR-34、miR-378、miR-138、miR-32、SOX4 mRNA的表达情况,Pearson相关分析检验miR-206表达量与SOX4的相关性;免疫印迹法检测两组标本中SOX4的表达情况,进一步在细胞实验中,通过转染miR-206mimic和miR-NC至离体培养的A549细胞中,免疫印迹法检测A549细胞中MMP-2、MMP-9、SOX4表达情况,划痕试验和Transwell法观察细胞迁移侵袭情况,利用荧光素酶素试验验证SOX4是miR-206的靶基因;再通过转染过表达SOX4的质粒至A549细胞,检测A549细胞中MMP-2、MMP-9、SOX4的表达情况,划痕试验和Transwell法观察细胞迁移侵袭情况。结果相比于正常肺组织,miR-206、miR-21在肺腺癌组织中的表达降低(P<0.01);miR-34、miR-378、miR-138、miR-32的表达在两组之间没有明显区别;肺腺癌组织中SOX4 mRNA的表达增加(P<0.01);miR-206与SOX4 mRNA的表达量成负相关(r=-0.344,P<0.01)。在细胞实验中,相比于miR-NC组,转染miR-206mimic后,A549细胞中MMP-2、MMP-9、SOX4的表达减少( P<0.05), A549细胞的迁移侵袭减少( P <0.01);荧光素酶试验结果显示, miR-206能降低SOX4-3'-UTR质粒的荧光素活性(P<0.05);转染过表达SOX4质粒后,相比于miR-206+空质粒组,A549细胞中MMP-2和MMP-9表达增加(P<0.05),细胞的迁移侵袭增加(P<0.01)。结论在肺腺癌组织中,miR-206低表达;miR-206可以通过下调SOX4从而抑制A549的迁移和侵袭。
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关键词
Lung adenocarcinoma,MiR-206,human,SOX4 protein
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