新型壳聚糖基仿生网络复合膜诱导骨髓间充质干细胞定向成骨分化

目的 探讨新型壳聚糖基网络复合膜诱导骨髓间充质干细胞(MSCs)定向成骨分化的可行性.方法 采用仿生学方法,壳聚糖、明胶、果胶按照一定比例制作成新型壳聚糖基仿生网络复合膜.设计4个组:实验组1(复合膜+常规培养基),对照组1(常规培养基),实验组2(复合膜+成骨诱导(OS)培养基),对照组2(OS培养基).通过倒置相差显微镜、四甲基偶氮唑盐(MTT)法、扫描电镜(SEM)检测细胞在复合膜上的生长和增殖情况;通过测定碱性磷酸酶(ALP)活性来评价MSCs在复合膜上的成骨分化能力;通过特殊染色和能谱分析(EDX)来评定钙盐的沉积.结果 MSCs在网络复合膜上贴附、生长良好且增殖旺盛.MTr法检测细胞活力显示实验组吸光度(OD)值与对照组比较无统计学意义(P＞0.05).SEM观察到细胞在支架材料表面呈聚集生长,分泌大量的细胞外基质,可见散在的结节形成.实验组1的ALP活性明显增高,与实验组2、对照组比较有统计学意义(P＜0.01).茜素红和Von Kossa染色可见实验组细胞分化后形成的钙化结节;ALP染色可见胞浆内蓝染颗粒;EDX检测到Ca、P沉积.结论 新型壳聚糖基网络复合材料具有良好的生物相容性,在不添加诱导剂的条件下,可以诱导MSCs定向成骨分化.