人腋窝毛乳头细胞的分离与培养

目的 探讨高效快速分离培养人腋窝毛乳头细胞的方法.方法 收集2015年10月至2016年5月陆军军医大学第一附属医院皮肤科腋臭术后含毛皮肤标本,分别用改良二步酶消化法、一步酶消化法和显微解剖法分离腋窝毛乳头,比较3种方法操作过程差异以及毛乳头分离效率、贴壁率、细胞迁出时间、总操作时间、实际操作时间的差异,并鉴定培养的腋窝毛乳头细胞.结果 与一步酶消化法和显微解剖法相比,改良二步酶消化法操作更简单,分离效率可达30％以上,1周后毛乳头贴壁率高达96％,细胞迁出时间缩短3～4 d,总耗时长于一步酶消化法和显微解剖法,但实际操作时间短于一步酶消化法和显微解剖法,且污染率低于显微解剖法.培养的腋窝毛乳头细胞早期可呈凝集性生长,6代以后的细胞呈非凝集性生长.免疫荧光结果示腋窝毛乳头细胞层黏连蛋白和Ⅳ型胶原阳性.结论 改良二步酶消化法是一种简单、高效、快速分离人腋窝毛乳头细胞的方法,少量标本即可培养出腋窝毛乳头细胞.