流式免疫微球芯片技术分析特异性血小板自身抗体

目的 建立流式免疫微球芯片技术(FCIBA)分析特异性血小板自身抗体的新方法.方法 使用不同红色荧光强度的微球,包被不同血小板膜蛋白单克隆抗体(抗GPⅡb/Ⅲa、抗GP Ⅰ a/Ⅱa、抗GPIV、抗GP Ⅰ b/Ⅸ和抗HLA-ABC单克隆抗体),制备特异性血小板自身抗体检测微球,用流式细胞仪检测微球捕获的血小板抗原-自身抗体复合物,检测结果与微孔板改进抗原捕获ELISA(MACE)进行比较,并检测了部分免疫性以及非免疫性血小板减少性紫癜患者血清中的5种特异性血小板自身抗体.结果 FCIBA分析抗GP Ⅱ b/Ⅲ a、抗GP Ⅰ a/Ⅱa、抗GPⅣ、抗GP Ⅰ b/Ⅸ和抗HLA-ABC 5种特异性血小板自身抗体,批内重复性变异系数(CV)分别为4.82%、6.09%、5.04%、5.73%、5.30%;稀释试验呈对数线性相关,相关系数(r)分别为0.997 2,0.996 6、0.998 8、0.996 5、0.998 2;新方法对5种特异性血小板自身抗体的分析结果均与MACE试验结果高度相关,r值分别为0.928 9、0.922 4、0.889 4、0.910 0、0.913 4(P均＜0.01).新方法分析98例免疫性血小板减少性紫癜患者的血清样本,血小板特异性自身抗体检出的阳性率为51.69%;其中,抗GPⅡb/Ⅲ a为40.82%,抗GP Ⅰa/Ⅱa为24.45%,抗GP Ⅳ为19.39%,抗GP Ⅰ b/Ⅸ为32.65%,抗HLA-ABC为17.35%.新方法分析40例非免疫性血小板减少性紫癜患者的血清样本,阳性率为0.结论 本研究建立了FCIBA分析特异性血小板自身抗体的新方法,可同时分析抗血小板GPⅡb/Ⅲa、GP Ⅰ a/Ⅱa、GP Ⅳ、GP Ⅰ b/Ⅸ和HLA-ABC5种特异性血小板自身抗体.