基质交联分子1对前列腺癌DU145细胞迁移侵袭及上皮-间充质转化的影响

目的 观察基质交联分子1(STIM1)对前列腺癌DU145细胞迁移、侵袭的影响并探讨其在上皮-间充质转化(EMT)过程中的作用.方法 将携带STIM1基因的小干扰RNA(siRNA)慢病毒载体STIM1-pGCSIL-GFP转染人激素非依赖性前列腺癌DU145细胞(KD组),同时设阴性对照组(NC组)及空白对照组(CON组).逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot验证抑制STIM1表达的有效性.采用划痕实验及Transwell迁移、侵袭实验检测抑制STIM1对肿瘤细胞运动及迁移、侵袭能力的影响.采用半定量RT-PCR及Western blot分别在mRNA及蛋白水平检测EMT标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波动蛋白(Vimentin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在各组细胞中的差异.结果 与对照组比较,转染STIM1-pGCSIL-GFP后,DU145细胞内STIM1的mRNA及蛋白水平均明显降低.划痕实验显示KD组DU145细胞的运动能力明显降低.细胞迁移结果显示,CON、NC、KD组每个视野细胞数分别为(92.0±14.2)、(87.3±2.3)、(60.8±10.3)个,KD组数目明显减少(P＜0.05);细胞侵袭实验提示,CON、NC、KD组每视野细胞数分别为(79.6±3.7)、(80.0±3.5)、(45.8±5.8)个,KD组侵袭数目明显减少(P＜0.05).RT-PCR和Western blot结果显示,KD组上皮标志物E-cadherin mRNA及蛋白表达水平增高(分别为NC组的1.38、1.72倍);间质标志物Vimentin的mRNA及蛋白表达水平降低(分别为NC组的0.67、0.74倍),α-SMA mRNA及蛋白表达水平降低(分别为NC组的0.23、0.54倍,P＜0.05).结论 抑制前列腺癌DU145细胞中STIM1表达后,细胞运动及迁移、侵袭能力均明显降低,这可能与逆转EMT相关.