谷氨酸受体拮抗剂对恶性黑素瘤WM451LU细胞增殖、迁移的调控作用及相关机制研究

目的：探讨谷氨酸受体拮抗剂对恶性黑素瘤WM451LU细胞增殖、迁移的调控作用及相关机制。方法取对数生长期人侵袭性恶性黑素瘤WM451LU细胞，分为3组，分别接受100μmol/L谷氨酸受体拮抗剂MK?801（MK?801组）、10μmol/L谷氨酸受体拮抗剂CPCCOEt（CPCCOEt组）或单纯培养基（对照组）处理。24 h后，噻唑蓝（MTT）法检测细胞增殖率，划痕实验检测细胞迁移能力，免疫印迹法检测增殖细胞核抗原（PCNA）、细胞膜及胞质中蛋白激酶Cα（PKCα）以及磷酸化MAPK（p?MAPK）表达水平。结果处理24 h后，对照组、MK?801组以及CPCCOEt组细胞增殖率分别为100%±1.1%、63%±3.1%、60%±2.4%，后两组与对照组比较，差异均有统计学意义（P<0.05）。划痕实验结果显示，对照组无细胞带随着时间的推移而逐渐变窄，划痕趋于愈合状态，而经MK?801及CPCCOEt作用后，无细胞带的变窄速度要明显缓慢，培养24 h后无细胞带仍然较宽，缩窄程度不明显。MK?801及CPCCOEt组细胞PCNA蛋白表达水平分别为77.0%±5.4%和72.0%±4.2%，显著低于对照组（100.0%±1.3%），差异均有统计学意义（P<0.05）。对照组、MK?801组以及CPCCOEt组细胞膜上PKCα表达水平分别为0.38±0.01、0.12±0.02、0.14±0.02，后两组与对照组比较，差异均有统计学意义（P<0.05）。MK?801组及CPCCOEt组p?MAPK表达水平分别为0.48±0.03、0.36±0.04，显著低于对照组（1.00±0.02），差异均有统计学意义（P<0.05）。结论体外阻滞谷氨酸受体能够抑制WM451LU细胞增殖、迁移，该作用可能部分由PKCα?MAPK信号通路介导。