miR-30c 过表达对斑马鱼早期心脏发育的影响

目的：探究 miR-30c 过表达对斑马鱼早期心脏发育的影响。方法于斑马鱼胚胎1细胞受精卵期，显微注射3个不同浓度梯度的 miR-30c 模拟物以实现过表达。通过计数在不同时间点斑马鱼胚胎的病死率及心率、显微镜观察斑马鱼大体形态及心包水肿情况，以及胚胎整体原位杂交等方法，评价 miR-30c 过表达对斑马鱼早期心脏发育的影响。结果与野生型对照组比较，随着过表达浓度的提高，斑马鱼胚胎的病死率逐渐增高，至8μmol／L 浓度时，斑马鱼受精后96 h 病死率已达80％。而同时，作为评价心脏功能重要指标的心率逐渐下降。此外，随着过表达浓度的递增，斑马鱼心包水肿的程度越来越高，且此种心包水肿随着时间的推移越来越严重。之后，通过胚胎整体原位杂交的方法，观察心脏部位特异性基因的表达，发现过表达 miR-30c的斑马鱼中，标记心房肌及心室肌探针的表达范围都有所扩大，心脏环化受到抑制，且心脏房室通道瓣膜处的基因表达缺失。结论miR-30c 过表达影响斑马鱼的早期心脏发育。