携抗ICAM-1单抗和抗CD34单抗双靶向微泡的制备及体外寻靶研究

目的 制备同时携抗ICAM-1单抗和抗CD34单抗的双靶向微泡,鉴定其基本性质,并观察体外寻靶能力.方法 采用“生物素-亲和素”桥连法分别构建携抗ICAM-1单抗和抗CD34单抗双配体(MBD)、携抗ICAM-1单抗(MBICAM-1)和携抗CD34单抗(MBCD34)3种靶向微泡,光学显微镜下观察靶向微泡的形状,并用马尔文激光粒度分析仪、DFY超声图像定量分析仪、激光共聚焦显微镜、流式细胞仪检测靶向微泡的基本特性和抗体结合率.倒置显微镜下观察双靶向微泡与内皮祖细胞(EPCs)和损伤人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的结合情况.结果 3种靶向微泡的形状、粒径、表面电位及抗体结合率差异均无统计学意义(P＞0.05),MBD的回声强度高于MBICAM-1、MBCD34和普通生物素化微泡(MBBiotin)(P＜0.01).MBD与EPCs和损伤HUVECs的结合率明显高于MBBiotin(P＜0.01),MBD和MBCD34与EPCs的结合率、MBD和MBICAM-1与损伤HUVECs的结合率差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 成功制备了携抗ICAM-1单抗和抗CD34单抗的双靶向微泡,体外实验证实此双靶向微泡与内皮祖细胞和损伤血管内皮细胞均能特异性结合.