核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎性小体在癫痫大鼠模型中的表达及褪黑素对其的影响

目的 观察核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)炎性小体在癫痫大鼠模型中的表达水平,并探讨褪黑素的脑保护作用.方法 选择144只日龄21～30 d的SD大鼠,应用氯化锂-匹罗卡品建立癫痫持续状态动物模型,按随机数字表法分为对照组、癫痫组、褪黑素组,每组各48只.每组按24 h、48 h、72 h、7 d时间点再分为4个亚组,每亚组12只,观察大鼠的行为学变化,用荧光定量PCR和免疫组织化学法检测大鼠海马组织中 NLRP3、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、白细胞介素-1β(IL-1β)的表达水平.结果 造模成功后癫痫组NLRP3阳性细胞数增多,在72 h达高峰;在24 h、48 h、72 h、7 d时间点,NLRP3阳性细胞数在癫痫组(14. 20 ± 1. 64、23. 60 ± 1. 14、31. 20 ± 1. 30、25. 40 ± 2. 07)较褪黑素组(10. 60 ± 0. 89、17. 80 ± 1. 48、24. 00 ± 0. 71、20. 20 ± 1. 92 )及对照组(2. 60 ± 0. 89、2. 40 ± 1. 14、2. 40 ± 1. 14、2. 40 ± 0. 55)均增高,差异均有统计学意义(F＝122. 977、375. 125、962. 743、262. 916,均P＜0. 05);NLRP3 mRNA相对表达量在癫痫组(2. 57 ± 0. 12、3. 34 ± 0. 10、4. 84 ± 0. 19、3. 55 ± 0. 13 )较褪黑素组(2. 03 ± 0. 08、2. 71 ± 0. 08、4. 03 ± 0. 14、2. 48 ± 0. 18)及对照组(1. 07 ± 0. 13、1. 08 ± 0. 15、1. 08 ± 0. 23、1. 07 ± 0. 18)均增高,差异均有统计学意义(F＝422. 386、1 154. 957、1 132. 112、512. 149,均 P＜0. 05);Caspase-1 mRNA相对表达量在癫痫组(2. 47 ± 0. 07、3. 05 ± 0. 15、4. 39 ± 0. 18、3. 14 ± 0. 11)较褪黑素组(1. 85 ± 0. 07、2. 49 ± 0. 08、3. 60 ± 0. 12、2. 15 ± 0. 12)及对照组(0. 98 ± 0. 25、0. 99 ± 0. 15、0. 98 ± 0. 23、0. 99 ± 0. 18)均增高,差异均有统计学意义(F＝620. 099、580. 796、1 125. 225、645. 082,均P＜0. 05);IL-1β mRNA相对表达量在癫痫组(2. 32 ± 0. 15、2. 90 ± 0. 18、4. 18 ± 0. 16、2. 74 ± 0. 07)较褪黑素组(1. 78 ± 0. 09、2. 35 ± 0. 11、3. 24 ± 0. 13、1. 78 ± 0. 16)及对照组(0. 97 ± 0. 13、0. 99 ± 0. 15、0. 97 ± 0. 23、0. 97 ± 0. 18)均增高,差异均有统计学意义(F＝267. 952、398. 767、1 140. 384、438. 962,均P＜0. 05).结论 NLRP3炎性小体在癫痫发作后被激活,在癫痫脑损伤中发挥一定作用;褪黑素可能通过抗炎作用抑制NLRP3炎性小体的表达,发挥脑保护作用.