羟考酮对大鼠肠缺血再灌注损伤的影响及自噬在其中的作用

目的 评价羟考酮对大鼠肠缺血再灌注损伤的影响及自噬在其中的作用.方法 健康成年雄性SD大鼠24只,6～9周龄,体重180～220 g,采用随机数字表法分为4组(n=6):假手术组(S组)、肠缺血再灌注组(I/R组)、羟考酮组(O组)和羟考酮+自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤组(O+3-MA组).采用夹闭肠系膜上动脉1h再灌注2h的方法制备肠缺血再灌注损伤模型.O组和O+3-MA组于缺血前15 min时尾静脉注射羟考酮0.5 mg/kg.O+3-MA组于缺血前10 min腹腔注射3-MA 30mg/kg.于缺血前即刻胃内灌注异硫氰酸荧光素标记的右旋糖酐(FITC-dextran).再灌注2h时心尖穿刺采集血样,测定血清FITC-dextran浓度;于再灌注2h时心尖穿刺采集血样,ELISA法测定血清TNF-α、IL-1β浓度;取小肠组织,观察病理学变化并行Chiu评分;Western blot法测定紧密连接蛋白occludin、自噬相关蛋白Beclin-1和微管相关蛋白1轻链3(LC3)的表达,并计算LC3Ⅱ与LC3 Ⅰ表达比值(LC3Ⅱ/Ⅰ比值).结果 与S组比较,I/R组Chiu评分、血清FITC-dextran、TNF-α和IL-1β浓度、LC3Ⅱ/Ⅰ比值升高,Beclin-1表达上调,occludin表达下调(P＜0.05);与I/R组比较,O组Chiu评分、血清FITC-dextran、TNF-α和IL-1β浓度降低,LC3Ⅱ/Ⅰ比值升高,occludin和Beclin-1表达上调(P＜0.05),O+3-MA组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05);与O组比较,O+3-MA组Chiu评分、血清FITC-dextran、TNF-α和IL-1β浓度升高,LC3Ⅱ/Ⅰ比值降低,occludin和Beclin-1表达下调(P＜0.05).结论 羟考酮可减轻大鼠肠缺血再灌注损伤,其机制可能与增强肠组织自噬水平有关.