结核分枝杆菌诱导的THP-1细胞转化及其相关信号传导通路的研究

目的 了解结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)体外诱导人单核细胞株THP-1向类上皮细胞(EC)转化的效应及其相关信号传导通路和调控作用.方法 建立人结核分枝杆菌H37Rv株、牛分枝杆菌bovis株、草分枝杆菌phlei株THP-1细胞感染模型.采用间接免疫荧光法检测感染前后THP-1细胞表面单核细胞或巨噬细胞分化抗原CD115和EC分化抗原CD82的表达情况.采用Sandwich ELISA Kits检测感染前后THP-1细胞p38MAPK(p38丝裂原活化蛋白激酶)、Akt1(丝/苏蛋白激酶)和STAT3(信号转导因子和转录活化因子)磷酸化水平.采用特异性阻断剂,了解各信号通路阻断前后CD115和CD82表达水平变化.结果 3株分枝杆菌感染的THP-1细胞均出现CD115表达减弱和CD82明显表达的现象.H37Rv株或bovis株感染的THP-1细胞可出现一过性p38MAPK磷酸化水平上调,但PI3K(磷脂酰肌醇3-激酶)/Akt和STAT3磷酸化水平均无明显变化.p38MAPK、PI3K/Akt或JAK/STAT通路被阻断后,上述3株分枝杆菌感染的THP-1细胞仍表达CD115.JAK/STAT通路被阻断时,各分枝杆菌感染的THP-1细胞仍表达CD82.但p38MAPK、PI3K/Akt通路被阻断时,H37Rv株和bovis株感染的THP-1细胞CD82表达消失.结论 结核分枝杆菌H37Rv株和bovis株感染后可诱导THP-1细胞向EC转化,p38MAPK、PI3K/Akt参与和调控了该转化过程,其中以p38MAPK通路较为重要.