咖啡鞣酸对单纯疱疹病毒-1诱导单纯疱疹病毒感染过程中Toll样受体9信号通路的干预机制

目的 探讨咖啡鞣酸(CGA)对单纯疱疹病毒-1((HSV-1)感染BV2小胶质细胞诱导单纯疱疹病毒性脑炎(HSE)细胞模型过程中Toll样受体9(TLR9)信号通路的干预机制.方法 用HSV-1刺激的BV2细胞建立HSE的细胞模型,然后用不同浓度梯度(25、50、100 ng/ml)的CGA进行处理.通过噻唑蓝(MTF)法测定细胞存活率.分别通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Westernblot测定TLR9、骨髓分化因子88 (Myd88) mRNA和蛋白的表达.通过酶联免疫吸附试验(ELISA)以及RT-PCR测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达.结果 CGA治疗后细胞存活率显著改善[模型组为:(43.0±8.7)％;CGA组分别为(57.0±8.4)％、(64.0±7.6)％、(84.0±4.2)％],模型组TLR9、Myd88、TNF-α水平显著高于正常组(蛋白表达分别为:0.84±0.05比0.18±0.13,P=0.000;0.89±0.03比0.76 ±0.11,P=0.002;292.34±8.16比20.76±5.72,P=0.000;mRNA相对表达量分别为:3.01±0.87,P=0.000;5.79±0.72,P=0.000;20.12±10.17,P=0.000),CGA干预后,其水平显著低于模型组(P =0.000).结论 在HSV-1感染BV2小胶质细胞诱导HSE细胞模型中,咖啡鞣酸可以通过抑制TLR9信号通路中TLR9、Myd88分子的表达,从而抑制促炎因子TNF-α的释放,减轻炎性反应.