大鼠尾静脉注射脑源性微粒的半数致死量测定

目的 测定经大鼠尾静脉注射脑源性微粒后的半数致死量及其95％可信区间,为进一步研究脑源性微粒在体内外实验时的应用剂量范围提供基础的数据依据.方法 利用脑组织匀浆+分步离心法在体外制备脑源性微粒并用透射电镜鉴定,流式细胞仪测定脑源性微粒的浓度.首先从大鼠尾静脉注射脑源性微粒预试出最大100％和最小0％的致死剂量,然后分别给予9组大鼠尾静脉注射9个数量梯度的脑源性微粒,观察给药后大鼠的临床表现和7d内各组大鼠死亡情况,利用寇氏法、线性回归法、概率单位法等计算半数致死量及其95％可信区间(CI).结果 透射电镜下可见制备的脑源性微粒有完整的膜结构,直径位于100～1 000 nm之间.鼠尾静脉注射脑源性微粒后大鼠可出现角弓反张、偏瘫、反应迟钝及死亡等不同的临床表现.用冠氏法计算大鼠尾静脉注射脑源性微粒7d后的半数致死剂量为8.804×107个,95％ CI为7.659×107 ～ 10.121×107.用线性回归法计算大鼠尾静脉注射脑源性微粒后7d的半数致死剂量为10.873×107个,95％ CI为8.056×107～ 13.690×107.用概率单位法计算大鼠尾静脉注射脑源性微粒后7d的半数致死剂量为8.748×107个,95％ CI为7.585×107～ 10.114×107.3种计算方法之间经统计学分析,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 随着循环血中脑源性微粒数量的升高,大鼠死亡率增加,为后续研究提供了理论依据.