气道内注射JNK siRNA对大鼠移植肺缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨气道内注射c-Jun氨基末端调节激酶小分子干扰RNA(JNK siRNA)对大鼠移植肺缺血再灌注损伤的影响.方法 实验一雄性Wistar大鼠32只,体重250～280 g,采用随机数字表法分为2组(n=16):对照组(C组)和JNK siRNA组.JNK siRNA组气道内注射JNK siRNA质粒2 mg∕kg,C组气道内注射乱序siRNA质粒2 mg∕kg,均用无菌磷酸盐缓冲液稀释至0.2 ml.给药48 h时,每组处死6只大鼠,取左肺组织,分别采用Western blot法和RT-PCR法测定JNK及其mRNA的表达水平.每组其余10只大鼠用于左肺移植.实验二雄性Wistar大鼠30只,体重250～280 g,采用随机数字表法分为3组(n=10):假手术组(S组)、移植肺缺血再灌注组(I∕R组)和移植肺缺血再灌注+JNK siRNA组(I∕R+JNK siRNA组).I∕R组大鼠接受C组左肺移植;I∕R+JNK siRNA组接受JNK siRNA组左肺移植.分别于机械通气15 min和再灌注30、60、90、120 min时,采集股动脉血样行血气分析,记录PaO2,计算氧合指数(PaO2÷FiO2).移植肺恢复灌注120 min时,采集股动脉血样,采用ELISA法检测血清IL-8、TNF-α和干扰素-γ(IFN-γ)的浓度,然后处死大鼠取左肺组织,计算肺湿重∕干重(W∕D)比值,光镜下观察病理学结果,并行肺损伤评分,采用ELISA法测定NF-κB和活化蛋白-1(AP-1)的活性.结果 实验一与C组比较,JNK siRNA组JNK及其mRNA表达下调(P<0.05).实验二与S组比较,I∕R组和I∕R+JNK siRNA组氧合指数降低,血清IL-8、TNF-α和IFN-γ的浓度、肺W∕D比值、肺损伤评分、NF-κB和AP-1的活性升高(P<0.05);与I∕R组比较,I∕R+JNK siRNA组氧合指数升高,血清IL-8、TNF-α和IFN-γ的浓度、肺W∕D比值、肺损伤评分、NF-κB和AP-1的活性降低(P<0.05).结论 气道内注射JNK siRNA可减轻移植肺缺血再灌注损伤,其机制可能与抑制炎症反应有关.