八聚体结合转录因子4假基因5对膀胱癌T24细胞迁移和侵袭行为的影响

目的 探讨八聚体结合转录因子4假基因5(OCT4-Pg5)对人膀胱癌T24细胞迁移和侵袭的影响及其机制.方法 采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测OCT4-pg5在5种膀胱癌细胞株和膀胱永生化上皮细胞SV-HUC-1中的表达.利用Lipfectamine 2000将OCT4-pg5干扰质粒瞬时转染至膀胱癌T24细胞中,通过RT-qPCR检测各组细胞中OCT4-pg5的转染效果;通过细胞划痕实验和Transwell侵袭实验检测干扰OCT4-pg5的表达对T24细胞迁移和侵袭的影响;RT-qPCR及蛋白质印迹法(Western blot)检测上皮型钙黏附蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、β-连环蛋白(β-catenin)表达变化.结果 与膀胱永生化上皮细胞(SV-HUC-1)比较,OCT4-pg5在膀胱癌细胞(5637、EJ、BIU-87、TCCSUP和T24)中的表达增加,以T24细胞最为明显(P＜0.01).RT-qPCR结果显示:转染si-OCT4-pg5干扰质粒后,T24细胞中OCT4-pg5表达明显降低(P＜0.01).划痕实验及Transwell侵袭实验结果表明,干扰OCT4-pg5表达后,T24细胞的迁移率为(28.50±4.08)％,细胞穿过膜数目为(104.50±6.95)个;分别与相应阴性对照组比较明显减弱[(43.26±5.49)％,P＜0.01;(140.50 ±8.90)个,P＜0.01].RT-qPCR和Western blot结果显示:与阴性对照组比较,干扰OCT4-pg5表达后,T24细胞的E-cadherin表达增加(P＜0.01),Vimentin和β-catenin表达减少(P＜0.01,P＜0.01).结论 OCT4-pg5在膀胱癌细胞中呈高表达,干扰OCT4-pg5表达能抑制膀胱癌T24细胞迁移和侵袭,其机制可能与其影响E-cadherin、Vimentin、β-catenin蛋白表达有关.