不同方法提取肝细胞质膜蛋白效率的比较

目的 比较两种提取方法对肝细胞质膜蛋白提取效率的差异,以提高肝细胞质膜蛋白的提取效率.方法 取用手术切取的47例肝细胞癌和43例正常肝组织,分别利用试剂盒和改良法提取肝细胞质蛋白和膜蛋白;BCA法进行蛋白定量后,通过Western blot检测提取出的质蛋白和膜蛋白样品中Na+/K+-ATPase和GAPDH相对含量,比较膜蛋白提取特异性.结果 利用改良提取法(B组)对正常肝细胞和肝癌细胞质膜蛋白的提取量分别为(1367.30±486.37)mg/L和(1059.80±226.29)mg/L,均明显高于试剂盒提取量(345.58±117.89)mg/L和(486.24±154.96)mg/L,P＜0.05);改良提取法提取蛋白中反映质蛋白的指标GAPDH含量显著低于试剂盒提取法(P＜0.05).结论 通过改良提取方法可有效提高肝细胞膜蛋白提取的丰度和特异性.