脱氧核酶抑制Bcl-2基因表达诱导人肝癌细胞凋亡的研究

目的 研究利用脱氧核酶抑制Bcl-2表达对人肝癌BEL-7402细胞凋亡的影响.方法 合成针对Bcl-2基因的“10～23”型脱氧核酶及其类似物；转染入肝癌细胞；RT-PCR检测脱氧核酶细胞内Bcl-2mRNA的切割作用；荧光免疫方法测定脱氧核酶对Bcl-2蛋白表达的影响；流式细胞仪检测脱氧核酶对肝癌细胞凋亡的影响.结果 “10 ～ 23”型脱氧核酶及其类似物成功转染入肝癌；非修饰脱氧核酶(DzT)和修饰的脱氧核酶(DzTi)在胞内能有效地切割Bcl-2 mRNA,DzTi比DzT的切割活性显著；荧光免疫法测的DzT和DzTi能显著地下调细胞内Bcl-2蛋白水平(P＜0.01),抑制肝癌细胞的生长(P＜0.05).流式细胞术结果提示,DzT和DzTi细胞凋亡率明显升高出现凋亡峰,与对照组细胞及脱氧寡核苷酸DzT和 DzTi凋亡率差异有统计学意义(P ＜0.05)；DzT和DzTi组细胞出现细胞周期阻滞,表现为G0/G1细胞所占比例上升,S期细胞所占比例下降.结论 脱氧核酶可以有效切割Bcl-2 mRNA,抑制Bcl-2蛋白表达和促进肝癌细胞凋亡.