人骨肉瘤细胞株HMG63肿瘤干细胞筛选与鉴定

目的 建立1种分离人骨肉瘤细株HMG63肿瘤干细胞新模型.方法 采用无血清干细胞培养基对人骨肉瘤HMG63瘤细浮培养形成细胞球,并予阿霉素耐药处理,把耐药细胞株注入裸鼠体内致瘤,致瘤成功后,在瘤体内注射化疗药顺铂,这样使得骨肉瘤肿瘤干细胞在增殖分化的同时反复富集后,提取细胞培养筛选,这样可获得骨肉瘤干细胞和其亚型.采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫组织化学、流式细胞仪等鉴定.结果 在无血清肿瘤干细胞培养基中,人HMG63细胞能有效形成悬浮生长的克隆球,流式检测结果表明克隆球低表达CD24(14％),高表达CD133 (99％),同时高表达干细胞标志物Oct-4、Nanog等.结论 通过无血清悬浮球培养结合抗肿瘤耐药筛选,可以从HMG63细胞中分离出具有干细胞特征的HMG63细胞克隆.