副血链球菌fap1-orf4基因座位编码的ORF3调控Fap1糖基化与成熟的研究

目的 研究副血链球菌fap1-orf4基因座位编码的ORF3是否调控Fap1的糖基化与成熟,并探讨其对副血链球菌黏附功能的影响.方法 采用基因置换技术构建副血链球菌orf3等位基因置换突变株,利用瓦补分析和Western blot检测副血链球菌Fap1的表达水平,并采用全唾液包被的羟磷厌石黏附试验检测副血链球菌的黏附能力.结果 (1)副血链球菌orf3基凶置换突变株VT1774未发生极化;(2)Western blot检测菌株VT1774显示成熟的Fap1(Mr约220×103)被不成熟的Fap1(M,约470 × 103)所取代,互补分析显示VT1774的互补株VT1775能恢复表达成熟的Fap1;(3)菌株VT1774黏附能力显著下降.结论 副血链球菌fap1-orf4基因座位编码的ORF3是Fap1糖基化与成熟所必需的,orf3基因置换导致Fap1成熟障碍与菌株黏附力显著下降.