同源异型核基因1过表达诱导上皮-间充质转化促进乳腺癌细胞转移能力的研究

目的 观察同源异型核基因1(Prrx1)过表达对乳腺癌细胞上皮-间充质转化(EMT)作用及迁移能力的影响.方法 用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)从MCF-7、MDA-MB-468、BT-549乳腺癌细胞中筛选出Prrx1低表达细胞株.用Prrx1过表达慢病毒载体感染筛选出的Prrx1低表达乳腺癌细胞株,Western blot验证感染成功后,观察感染前后乳腺癌细胞形态变化.Real-time PCR检测感染对乳腺癌细胞E-钙黏蛋白及波形蛋白表达的影响.Transwell细胞迁移实验检测Prrx1对乳腺癌细胞迁移能力的影响.结果 乳腺癌MCF-7、MDA-MB-468、BT-549细胞的Prrx1 mRNA的相对表达量分别为15.05±0.18、11.78±0.42、7.98±0.37,因此3种乳腺癌细胞中MCF-7细胞Prrx1表达量最低,Prrx1过表达慢病毒载体感染成功后,MCF-7细胞形态由多角形变为长梭形.Real-time PCR实验结果显示,感染后Prrx1 mRNA在实验组、空白对照组、病毒对照组的相对表达量分别为2.16±0.07、10.18±0.07、10.20±0.07,Prrx1 mRNA水平是感染前的259.57倍(t=227.100,P=0.000) ,两对照组比较差异无统计学意义 (t=1.315,P=0.202) .感染后E-钙黏蛋白mRNA在实验组、空白对照组、病毒对照组的相对表达量分为别4.00±0.02、3.56±0.02、3.51±0.05,E-钙黏蛋白mRNA水平是感染前的0.71倍(t=6.007,P=0.000),而两对照组比较差异无统计学意义(t=0.730,P=0.476).感染后波形蛋白mRNA在实验组、空白对照组、病毒对照组的相对表达量分别为8.79±0.42、10.18±0.06、9.97±0.05,波形蛋白mRNA水平是感染前的2.27倍(t=11.900,P=0.000),两对照组比较差异无统计学意义(t=2.052,P=0.057).Transwell实验显示Prrx1过表达组发生迁移的细胞数[(73.40±10.21)个]高于病毒对照组[(44.60±8.24)个]及空白对照组[(45.60±6.62)个],差异有统计学意义(t=6.837,P=0.000),空白对照组和病毒对照组差异无统计学意义(t=0.295,P=0.772).结论 Prrx1基因过表达可诱导乳腺癌细胞发生EMT使其迁移能力增强.