尾静脉注射荧光素酶标记的膀胱癌T24细胞动物转移模型的构建

目的 探讨通过尾静脉注射不同剂量转染可生物发光的膀胱癌T24细胞更加高效地构建裸鼠膀胱癌转移模型.方法 通过转染构建有萤火虫荧光素酶(Luc)片段的慢病毒质粒,从而获得可稳定表达Luc的T24细胞(T24-Luc).然后对3组裸鼠,每组5只,通过尾静脉注射的方式分别注射2×106,4×106,8×106个T24-Luc细胞,于2、3、4周行小动物活体可视荧光成像技术观测T24-Luc在裸鼠体内的分布,于4周后处死裸鼠,取出裸鼠肺脏观测转移病灶数量并进行t检验分析.结果 成功构建可生物发光膀胱癌细胞株T24-Luc,生物发光活性与细胞数高度线性相关(R2=0.995).经小动物活体生物发光成像观测,通过尾静脉注射T24-Luc后可构建膀胱癌转移模型,经尾静脉注射3组,每组5只全部成功.注射2×106个T24-Luc细胞组,裸鼠未见转移灶,注射4 ×106个T24-Luc细胞组转移灶数量为(6.80±1.72)个,注射8×106个T24-Luc细胞组转移灶数量为(29.80±3.18)个.结论 尾静脉注射8×106个T24-Luc细胞所构建的膀胱癌转移模型出现转移灶成功率更高,可成功构建非侵入性、可持续动态观测的膀胱癌肺转移模型.