供体内皮bcl-xL基因转染对大鼠主动脉移植免疫反应的影响

目的 观察供体内皮细胞过表达bcl-xL基因对大鼠主动脉移植受体免疫反应的影响.方法 构建增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标记的凋亡抑制基因bcl-xL的Tie2启动子慢病毒表达载体,经尾静脉注射转染供体SD大鼠,后行SD→SD和SD→Wistar大鼠的主动脉同基因及同种异基因移植.移植后1周,荧光显微镜观察及实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)分析移植主动脉内皮bcl-xL过表达;并分离、培养移植动脉内皮细胞、供体及受体大鼠脾细胞、细胞毒性T细胞,收集血清,行混合淋巴细胞反应实验、T细胞杀伤实验及补体依赖的抗体介导的细胞毒实验,明确供体内皮过表达bcl-xL基因对大鼠主动脉移植免疫反应的影响.结果 Tie2启动子慢病毒表达载体转染组移植主动脉内皮显著过表达bcl-xL基因[(8.5±1.1)倍比(1.0±0.2)倍,t=17.050,P =0.002].异基因移植组受体脾细胞增殖率显著高于同基因移植组[(14.2±1.8)倍比(1.0±0.1)倍,t=23.599,P=0.001;(14.7±2.2)倍比(0.8±0.1)倍,t=25.037,P=0.001]、移植动脉内皮细胞存活率显著低于同基因移植组(14.5％比92.7％,x2=244.558,P=0.000;8.9％比95.8％,x2=290.494,P=0.000;15.1％比96.7％,x2 =269.251,P=0.000;10.1％比94.7％,x2=286.190,P=0.000).而转染与非转染bcl-xL的同基因移植组间和异基因移植组间,脾细胞增殖率[(1.0±0.1)倍比(0.8±0.1)倍,t=2.108,P=0.068;(14.2±1.8)倍比(14.7±2.2)倍,t=-1.012,P=0.341]和移植动脉内皮细胞存活率(92.7％比96.7％,x2=3.078,P=0.079;95.8％比94.7％,x2=0.497,P=0.481;14.5％比8.9％,x2=2.917,P =0.088;;15.1％比10.1％,x2=2.286,P =0.131;96.6％比97.3％,x2=0.344,P=0.558;91.5％比92.1％,x2=0.033,P=0.856;19.8％比15.4％,x2 =0.387,P=0.239;10.2％比13.8％,x2=1.515,P=0.218)差异无统计学意义.结论 大鼠供体内皮过表达bcl-xL基因对主动脉移植免疫反应无显著影响.