核糖核酸干扰亚甲基四氢叶酸还原酶表达对胃癌细胞生长的影响

目的 分析RNA干扰亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenetetrahydrofolate reductase,MTHFR)基因表达后对人胃癌细胞生存活力及生长周期的影响.方法 构建含人MTHFR靶点的小分子干扰RNA真核表达载体,将其转染人人胃癌MKN45细胞.以PCR检测转染结果,Wester印迹法证实转染影响MTHFR的蛋白表达,以四甲基偶氮唑盐微量酸反应比色法检测细胞生存活力,流式细胞术检测细胞周期改变.结果 特异性干扰MTHFR表达使胃癌MKN45细胞生存活力明显降低,仅为对照组的65%(0.188±0.015比0.277±0.024,P＜0.01).同时细胞形态发生改变,由原先饱满、边缘光整的多边形细胞变为细长梭形多触角细胞.流式细胞术检测发现细胞周期主要受阻在G2/M期(P＜0.01).结论 RNA干扰MTHFR表达后能影响胃癌细胞生存活力及阻滞细胞周期进程,可望成为肿瘤基因防治的新靶点.