小干扰核糖核酸沉默磷脂酰肌醇-3激酶调节亚基3基因对胆囊癌细胞增殖和迁移能力的影响

目的 观察小干扰RNA (siRNA)沉默磷脂酰肌醇-3激酶调节亚基3(PIK3 R3)基因对胆囊癌细胞NOZ、GBC-SD增殖和迁移能力的影响.方法 构建针对PIK3R3的siRNA(si-PIK3R3),应用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)技术检测转染后的胆囊癌细胞NOZ、GBC-SD中PIK3R3 mRNA和蛋白表达,应用细胞计数试剂盒(CCK-8)增殖实验检测转染0～5d细胞增殖能力的变化,应用Transwell小室实验检测转染48 h后胆囊癌细胞迁移能力的变化.应用SPSS 22.0统计软件分析,多组间数据比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD-t检验.结果 si-PIK3R3转染组和si-NC阴性对照组成功转染进胆囊癌细胞NOZ、GBC-SD内;NOZ细胞si-PIK3R3组的PIK3R3 mRNA (0.119±0.447)表达量显著低于si-NC组(1.000±0.398)(t=165.100,P＜0.05);GBC-SD细胞si-PIK3R3组的PIK3R3 mRNA(0.085 ±0.593)显著低于si-NC组(1.000±0.669)(t=500.200,P＜0.05);NOZ、GBC-SD细胞si-PIK3 R3转染组PIK3R3蛋白的表达量明显低于阴性对照组;NOZ、GBD-SD细胞si-PIK3R3组增殖和迁移能力下降,NOZ细胞CCK-8实验结果显示0 ～5 d si-PIK3R3转染组的吸光度值分别为0.185±0.007、0.163±0.013、0.229±0.019、0.240±0.017、0.273±0.012、0.350±0.069(t=11.960,P＜0.05);48 h Transwell实验结果显示si-PIK3 R3转染组迁移的细胞数为(69.0±4.5)个,均明显低于si-NC组(t=25.120,P＜0.05).GBC-SD细胞CCK-8实验结果显示0～5 d si-PIK3R3转染组的吸光度值分别为0.153±0.003、0.158±0.002、0.201±0.010、0.240±0.012、0.297±0.018、0.483±0.024(t=14.160,P＜0.05);48 h Transwell实验结果显示si-PIK3 R3转染组迁移的细胞数为(91.0±3.5)个,均明显低于si-NC组(t=25.390,P＜0.05).结论 si-PIK3 R3可抑制人胆囊癌细胞的增殖和迁移能力,提示PIK3 R3在胆囊癌的发生发展过程中发挥重要作用.