PI3K∕Akt信号通路在异丙酚抑制人肝癌细胞侵袭中的作用

目的 评价磷脂酰肌醇3?激酶(PI3K)∕蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶(Akt)信号通路在异丙酚抑制人肝癌细胞侵袭中的作用.方法 将HepG2细胞用含10%胎牛血清的 RPMI 1640培养基于37 ℃、5%CO2的培养箱中培养,当细胞稳定进入对数生长期时,采用随机数字表法分为6组(n=18):对照组(C组);异丙酚组(P组)加入120 μg∕ml异丙酚;PI3K∕Akt信号通路激动剂IGF?1组(IGF组)加入10 nmol∕L IGF?1;PI3K∕Akt信号通路抑制剂LY294002组(LY组)加入10 μmol LY294002;IGF?1+异丙酚组(IGF+P组)先加入10 nmol∕L IGF?1孵育24 h,再加入120 μg∕ml异丙酚;LY294002+异丙酚组(LY + P组)先加入10 μmol LY294002孵育24 h,再加入120 μg∕ml异丙酚.于孵育24 h时,采用Transwell法检测细胞的侵袭力,采用RT?PCR法检测PI3K和Akt的mRNA表达,采用West?ern blot法检测Akt、PI3K及磷酸化Akt(p?Akt)的表达.结果 与C组比较,P组、P+IGF组、LY组和P+LY组侵袭细胞计数减少,细胞PI3K及其mRNA表达下调,p?Akt∕Akt比值下降,Akt mRNA表达下调,IGF组侵袭细胞计数增加,细胞PI3K 及其mRNA表达上调,p?Akt∕Akt比值升高,Akt mRNA表达上调(P<0.05);与P组比较,P+IGF组侵袭细胞计数增多,细胞PI3K 及其mRNA表达上调,p?Akt∕Akt比值升高,Akt mRNA表达上调,P+LY组侵袭细胞计数减少,细胞PI3K 及其mRNA表达下调,p?Akt∕Akt比值下降,Akt mRNA表达下调(P<0.05);与IGF组比较,P+IGF组侵袭细胞数减少,细胞PI3K及其mRNA表达下调,p?Akt∕Akt比值下降,Akt mRNA表达下调(P<0.05);与LY组比较,P+LY组侵袭细胞数减少,细胞PI3K 及其mRNA表达下调,p?Akt∕Akt比值下降,Akt mRNA表达下调(P<0.05).结论 异丙酚抑制人肝癌HepG2细胞侵袭的机制与抑制PI3K∕Akt信号通路的激活有关.