消退素D1影响自噬在急性胰腺炎小鼠中的作用

目的 探讨自噬在消退素D1防治急性胰腺炎(A P)小鼠中的作用.方法 将30只C57BL/6小鼠分为对照组、A P组、消退素D1组.腹腔注射雨蛙肽50μg·kg-1·h-1建立A P模型.于造模前1 h、造模后4 h小鼠腹腔内注射50μg/kg消退素D1.对照组腹腔注射等体积0.9％ 氯化钠溶液.采用比色法测定小鼠血清淀粉酶、脂肪酶水平,光学显微镜下观察胰腺和肺组织病理损伤表现,透射电子显微镜下观察小鼠胰腺腺泡细胞自噬相关结构,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法检测小鼠胰腺自噬相关标志物Beclin-1、p62、LC3-ⅡmRNA及蛋白质的表达.统计学方法采用单因素方差分析和SNK-q检验.结果 对照组、AP组、消退素D1组血清淀粉酶和脂肪酶水平比较,差异均有统计学意义(F=62.99、149.69,P均<0.01);消退素D1组小鼠血清淀粉酶和脂肪酶水平低于AP组[分别为(525.08±41.12)U/L比(752.62±42.03)U/L,(758.24±134.77)U/L比(1201.06±112.53)U/L)],差异均有统计学意义(均SNK-q检验,P均<0.01).对照组、AP组、消退素D1组小鼠胰腺、肺组织湿质量与体质量的比值比较,差异均有统计学意义(F=11.36、18.51,P均<0.05).消退素D1组胰腺和肺组织病理损伤评分均低于AP组[分别为(3.3±0.6)分比(5.6±0.6)分,(5.4±0.5)分比(8.8±0.4)分,差异均有统计学意义(均SNK-q检验,P均<0.05).透射电子显微镜显示,消退素D1组较AP组自噬体数量减少,体积变小.对照组、AP组、消退素D1组Beclin-1、p62、LC3-ⅡmRNA比较,差异均有统计学意义(F=270.95、151.83、124.77,P均<0.05);消退素D1组Beclin-1、p62、LC3-ⅡmRNA相对表达量分别为1.59±0.12、2.75±0.27、1.34±0.14,低于AP组的2.68±0.13、3.32±0.30、3.37±0.26,差异均有统计学意义(均SNK-q检验,P均<0.05).对照组、AP组、消退素D1组Beclin-1、p62、LC3-Ⅱ蛋白质表达水平比较,差异均有统计学意义(F=116.63、384.40、192.45,P均<0.05);消退素D1组Beclin-1、p62、LC3-Ⅱ蛋白质表达水平分别为0.98±0.03、0.57±0.04、0.31±0.03,低于AP组的1.34±0.07、1.02±0.03、0.48±0.04,差异均有统计学意义(均SNK-q检验,P均<0.05).结论 消退素D1可能通过促进小鼠AP自噬通路的修复,减少自噬受损,减轻AP严重程度.