自噬相关基因及蛋白在急性脊髓损伤后大鼠膀胱表达的实验研究

目的 观察自噬相关基因、蛋白在急性期脊髓损伤大鼠膀胱平滑肌组织中的表达.方法 选取24只雄性Wistar大鼠并随机分为模型组(12只)及对照组(12只).模型组采用改良Allen's法建立脊髓损伤模型,对照组仅予以椎板切除处理.于术后6h对2组大鼠进行BBB运动评分,采用尼氏染色观察2组大鼠脊髓形态学变化,采用Western blotting和免疫荧光染色法检测膀胱平滑肌细胞微管相关蛋白1轻链3(LC3)及P62表达,采用RT-PCR检测膀胱平滑肌自噬相关基因LC3、P62、Beclin1 mRNA表达.结果 模型组大鼠下肢运动功能BBB评分较对照组明显降低(P＜0.05).尼氏染色观察可见模型组神经元及尼氏小体数量减少;Western blotting染色提示模型组LC3-Ⅱ表达较对照组增高(P＜0.05),P62表达较对照组降低(P＜0.05).免疫荧光染色法提示模型组膀胱平滑肌LC3阳性细胞率较对照组增高(P＜0.05),P62阳性细胞率较对照组降低(P＜0.05).RT-PCR检测发现模型组LC3及Beclin1 mRNA水平较对照组升高(P＜0.05),P62 mRNA水平较对照组降低(P＜0.05).结论 自噬在急性脊髓损伤大鼠膀胱平滑肌中表达活跃,可能与脊髓损伤后神经源性膀胱发病机制有关.