氨基胍对兔缺血-再灌注损伤后视网膜形态学及一氧化氮和一氧化氮合酶表达的影响

背景 临床研究表明,多种眼科疾病如青光眼、视网膜中央动脉阻塞、缺血性视神经病变等均可导致视网膜缺血-再灌注损伤(RIRI),严重影响视功能,因而对治疗RIRI药物的研究是非常必要的.目的 观察并探讨氨基胍对兔RIRI后形态学的变化,并研究其对一氧化氮(N0)及一氧化氮合酶(iNOS)在视网膜中表达的影响及其机制.方法 清洁级日本大耳白兔66只,以随机数字表法分为正常组、RIRI模型组和氨基胍治疗组.用前房灌注生理盐水法升高眼压60 min后恢复灌注建立兔RIRI模型,氨基胍治疗组每日在模型兔腹腔内注射氨基胍注射液80 mg/kg,而RIRI模型组以同样的方法注射等量生理盐水.RIRI模型组和氨基胍治疗组分别于缺血即时、再灌注后6、24、72h各取2 只兔活体行眼底彩色照相及荧光素眼底血管造影(FFA).各组兔分别于再灌注后1、6、24、72 h用空气栓塞法处死并摘除眼球以制备视网膜切片,用TUNEL法检测视网膜组织神经细胞的凋亡变化,通过硝酸还原酶法检测NO浓度,比色法检测iNOS活力.结果 各时间点眼底彩色照相及FFA检查结果表明,与RIRI模型组比较,氨基胍治疗组视网膜水肿程度减轻,血管闭塞程度及比例降低,荧光素渗漏量及面积减轻并减少.TUNEL染色凋亡细胞计数检测表明,正常组兔视网膜未见TUNEL阳性细胞,而缺血-再灌注1、6、24、72 h后RIRI模型组兔视网膜凋亡细胞计数均明显高于氨基胍治疗组(F分组=2762.37,P=0.00；F时间=894.24,P=0.00).RIRI模型组和氨基胍治疗组各组内相邻时间点之间TUNEL阳性细胞的差异均有统计学意义(RIRI模型组:q=24.47、36.59、-20.37,P＜0.05；氮基胍治疗组:q=20.94、16.79、-6.92,P＜0.05),再灌注后24 h各组TUNEL阳性细胞数量达到高峰.各时间点RIRI模型组兔视网膜NO浓度明显高于氨基胍治疗组(q=3.84、4.01、8.91、3.75,P＜0.05),各组内相邻间点之间NO浓度的差异均有统计学意义(RIRI模型组:q=4.77、13.40、-10.29,P＜0.05;氨基胍治疗组:q=4.55、9.05、-5.08,P＜0.05),各组24 h视网膜中NO浓度达峰值.各时间点RIRI组视网膜iNOS活力均明显高于氨基胍治疗组(q=-3.74、-4.94、-6.53、-3.98,P＜0.05)；各组内相邻时间点间iNOS活力的差异均有统计学意义(RIRI模型组:q=8.43、6.71、-6.39,P＜0.05；氨基胍治疗组:q=4.16、5.08、-3.93,P＜0.05),各组24 h iNOS活力达峰值. 结论 氨基胍对维持RIRI后的视网膜形态和功能起保护作用,其作用机制可能为抑制iNOS的活性,减少NO的生成.