大鼠脂肪来源干细胞抵抗人血清介导的异种体液免疫杀伤作用及其机制

目的 研究大鼠脂肪来源干细胞(rASC)抵抗人血清介导的异种体液性杀伤的作用及其主要机制.方法 分离培养SD大鼠ASC,将2～8代的rASC作为实验材料,以大鼠淋巴细胞(rLC)作为对照.采用流式细胞技术,检测两种细胞异种抗原α-Gal的表达情况,体积分数20％正常人血清对两种细胞的杀伤作用、两种细胞分别与正常人血清中天然抗体IgM和IgG的结合情况,以及与正常人血清作用后补体C3c、C4c、C5b-9在两种细胞上的沉积情况.结果 成功分离和培养rASC,rASC表面标志检测呈CD44阳性、CD45阴性、CD90阳性及主要组织相容性抗原Ⅱ阴性,并成功诱导rASC向成脂细胞和成骨细胞分化.相对于rLC,rASC对人血清介导的异种体液性杀伤具有明显的抵抗作用,其几何平均荧光强度(Gmean)值为(20.42±2.80)％,低于rLC的(51.84±6.70)％(P＜0.01);rASC上α-Gal的表达量为13.97±0.33,显著低于rLC的24.47±3.03 (P＜0.05);rASC与人血清中IgG和IgM的结合量分别为9.4±2.0和5.73±1.0,显著低于rLC的107.2±4.8和27.49±3.9(P＜0.01);与正常人血清作用后,rLC可见显著的C3c、C4c和C5b-9沉积(Gmean值分别为1 924±509.4、177.3±37.17和37.05±7.4),但rASC仅有较少C3c和C4c沉积(Gmean值分别为294.6±38.02和35.23±3.1),C5b-9沉积几乎为阴性(Gmean值为5.63±1.74),两种细胞间比较,差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).结论 rASC能明显抵抗人血清介导的异种体液免疫杀伤作用,其机制可能与rASC低表达异种抗原α-Gal及抑制了补体攻膜复合物形成有关.