细颗粒物(PM2.5)暴露对哮喘小鼠呼吸道炎症的影响及和厚朴酚的干预作用
Chinese Journal of Applied Clinical Pediatrics(2018)
Abstract
目的 探讨细颗粒物(PM 2.5)对哮喘小鼠呼吸道炎症的影响及和厚朴酚的干预作用.方法 将50只雌性无特殊病原菌(SPF)级BALB/c小鼠按随机数字表法分为5组,每组10只.A组:正常对照组;B组:哮喘模型组;C组:PM 25低剂量暴露哮喘组;D组:PM 2.5高剂量暴露哮喘组;E组:和厚朴酚组.采用卵清蛋白(OVA)致敏并激发建立哮喘小鼠模型,B~E组第0天和第7天经小鼠腹腔注射100 mg/L OVA和氢氧化铝混合液0.1 mL致敏,第14天至第21天,以10 g/L OVA 9 g/L盐水溶液雾化30 min激发;C组及D组在OVA造模同时,分别于第1天、第8天、第15天及第21天对小鼠分别予低剂量(1 mg/kg)及高剂量(15 mg/kg) PM 2.5气管注入,E组在D组造模的基础上予8μg/kg和厚朴酚连续灌胃,A组小鼠以9 g/L盐水代替OVA同步进行实验.末次激发24h后麻醉并解剖小鼠,左肺进行肺泡灌洗留取支气管肺泡灌洗液(BALF)进行炎性细胞总数及分类计数;取右肺行HE染色、病理学检查;实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)分析技术检测小鼠外周血单个核细胞(PBMCs)中Toll样受体4(TLR4)和核因子κB(NF-кB) mRNA的表达及流式细胞仪检测Th17和Treg细胞的表达.结果 与A组比较,B、C、D组在支气管肺组织病理学上可见到支气管黏膜上皮细胞变形、脱落,基底膜增厚及管腔内分泌物增多,大量炎性细胞浸润,D组较C组更为明显,而E组小鼠呼吸道炎症明显减轻;C组及D组BALF中炎性细胞总数分别为(20.28±11.16)×108/L和(27.38±14.64)×108/L,嗜酸性粒细胞比例为0.177 8±0.064 9和0.229 1±0.098 7,与E组[(8.56±3.28)×108/L、0.041 5±0.013 5]比较均明显增高,差异均有统计学意义(均P<0.01);C组及D组PBMCs中TLR4 mRNA和NF-κB mRNA的表达分别为2.56±0.49、3.21±0.61和2.42±0.30、2.83±0.32,与E组(1.60±0.28、1.54±0.25)比较均显著增高,差异均有统计学意义(均P<0.05),且D组较C组增高明显,差异有统计学意义(P<0.05);C组及D组PBMCs中Th17细胞的表达分别为0.043 9±0.008 9、0.052 2 ±0.011 8,与E组(0.018 3±0.002 3)比较均显著增高,差异均有统计学意义(均P<0.05),C组及D组PBMCs中Treg细胞的表达分别为0.038 2±0.004 2、0.022 7±0.003 3,与E组(0.0645±0.003 8)比较均显著降低,E组情况较C组及D组明显改善.结论 PM 25暴露可导致哮喘小鼠呼吸道炎症加重,且高剂量PM 2.5暴露对其呼吸道的损伤更为明显,和厚朴酚能减轻PM 2.5暴露对哮喘小鼠呼吸道炎症作用,其作用机制与下调TLR4、NF-κB表达和调节Th17及Treg细胞平衡有关.
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Key words
Asthma,Particulate matter,Honokiol,Toll-like receptor 4,Nuclear factor-κB
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