NOD/LtJ小鼠不同发病阶段iNKT细胞频率及亚群变化分析研究
Chinese journal of microbiology and immunology(2018)
Abstract
目的 通过对NOD/LtJ小鼠在未发病、发病初期与发病末期不同组织器官中CD4+T细胞、CD8+T细胞、恒定自然杀伤T(iNKT)细胞频率及亚群进行观察分析,进一步了解NOD/LtJ小鼠不同发病阶段免疫功能状态.方法 选用雌性NOD/LtJ小鼠为实验对象.血糖仪检测小鼠空腹血糖值,根据尿糖阳性且连续两次≥11. 1 mmol/L作为1型糖尿病(T1D)发病标准.实验将动物分为未发病组、发病初期组、发病末期组.记录各组小鼠摄食量和饮水量、尿糖、体重、精神状态、被毛颜色、排尿量等;流式细胞术(FACS)检测各组小鼠外周血、胸腺、脾脏、肝脏、腹股沟淋巴结中CD4+T细胞、CD8+T细胞、iNKT细胞频率及亚群比例.结果 (1)与未发病和发病初期组比较,发病末期组小鼠精神萎靡,毛发粗糙,饮水量、进食量和排尿量增加,体重降低,胸腺指数、脾脏指数均下降,脾脏、肝脏、胸腺淋巴细胞绝对计数均显著降低(P<0. 05). (2)与未发病组比较,发病初期组CD4+T细胞频率在脾脏、肝脏、胸腺、腹股沟淋巴结中均显著增加(P<0. 05);与发病初期组比较,发病末期CD4+T细胞频率肝脏、胸腺、腹股沟淋巴结及外周血中均显著降低(P<0. 05);与未发病组比较,发病初期组CD8+T细胞频率在脾脏、胸腺中显著增加,在腹股沟淋巴结中显著降低(P<0. 05),与发病初期组比较,发病末期组CD8+T细胞频率在肝脏、胸腺中均显著降低,在腹股沟淋巴结中显著增加(P<0. 05).(3)与未发病组比较,发病初期组肝脏、腹股沟淋巴结中iNKT细胞频率均显著增高(P<0. 05);与发病初期组比较,发病末期组外周血、肝脏中iNKT细胞频率显著降低(P<0. 05);脾脏、胸腺iNKT细胞频率3组两两比较差异无统计学意义(P>0. 05). (4)iNKT1/iNKT2亚群比例:与未发病组比较,发病初期组和发病末期组胸腺iNKT1亚群比例均显著增加,iNKT2亚群比例均显著降低(P<0. 05),脾脏、肝脏、腹股沟淋巴结iNKT1及iNKT2亚群比例3组两两比较差异无统计学意义(P>0. 05). (5)与iNKT1亚群比较,iNKT2亚群在3组小鼠的脾脏、肝脏、腹股沟淋巴结中均显著降低(P<0. 05),在未发病组胸腺中,与iNKT1亚群比例比较,iNKT2亚群比例显著增高(P<0. 05). (6)与未发病组和发病末期组比较,发病初期组 IFN-γ、 IL-4、 IL-17A 水平均显著升高, IFN-γ/IL-4 的比值显著升高( P<0. 05);与未发病组和发病初期组比较,发病末期组IL-6水平显著升高(P<0. 05).与未发病组比较,发病初期和发病末期IL-10水平增高,且发病末期增高更加显著(P<0. 05). IL-2水平3组两两比较均无显著性差异(P>0. 05).结论 NOD/LtJ小鼠发病初期iNKT细胞频率的增加以及胸腺iNKT1亚群比例的显著增高可能参与了Ⅰ型糖尿病的发生.
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NOD/LtJ mice,T1D,iNKT cell
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