血管内皮生长因子mRNA干扰提高胶质母细胞瘤U251细胞对放化疗敏感性的研究

目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF) mRNA干扰对胶质母细胞瘤的治疗意义.方法 应用RNA干扰技术,对胶质母细胞瘤细胞株U251进行了VEGF mRNA干扰、辅以6Gy的放射剂量照射、化疗处理.在干扰前后用流式细胞技术、噻唑蓝(MTT)比色法及倒置显微镜观察等技术对U251细胞株的细胞周期、凋亡率、抑制率、细胞形态进行检测.结果 胶质母细胞瘤U251细胞在转染VEGF小干扰RNA(siRNA)后,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测发现VEGF mRNA的表达显著下降,均数下调大于60％；流式细胞技术显示,U251转染VEGFsiRNA后细胞出现G0～G1阻滞,G2 +M期细胞数目减少,转染细胞出现不同程度凋亡；MTT比色法可见,转染前不同浓度的紫杉醇对U251细胞有一定的抑制,作用48 h半数抑制剂量(IC50)=28.1 g/L.干扰后,紫杉醇在不同浓度对U251细胞的抑制率都有大幅度的提高,IC50=0.02 g/L；集落形成抑制实验中,单药物组与单放疗组在克隆形成率上差异无统计学意义(P＞0.05),U251细胞转染VEGFsiRNA后,明显抑制肿瘤细胞的集落形成,并对紫杉醇及放射治疗具有明显的协同作用；细胞学形态变化观察发现,转染后实验组的细胞形态明显差于未转染组细胞.结论 VEGF基因干扰可以抑制U251细胞的增殖、促进其凋亡,并能提高U251细胞对放化疗的敏感性.脂质体紫杉醇在细胞实验中表现出较好的抑制肿瘤作用及对VEGF基因干扰和放疗的协同作用.