紫外线及全反式维A酸对人皮肤及成纤维细胞中Hrd1表达的影响
Chinese Journal of Dermatology(2019)
Abstract
目的 探讨紫外线照射及全反式维A酸(ATRA)对人皮肤及成纤维细胞中Hrd1表达的影响及机制.方法 2017年12月至2018年6月于南京医科大学附属第一医院皮肤科收集12份人皮肤组织标本,30~40岁、60~70岁曝光及非曝光部位标本各3份,免疫组化检测各组Hrd1表达.将40只BALB/c小鼠分为对照组、紫外线组、ATRA组及紫外线+ATRA组,其中紫外线组、紫外线+ATRA组每日照射UVA 10J/cm2和UVB 30 mJ/cm2,紫外线+ ATRA组(照光前给药)、ATRA组小鼠背部剃毛区域每日均匀涂抹1次0.1 ml 0.1% ATRA药膏,对照组既不涂药也不照射紫外线.14周后处死小鼠并取背部皮肤免疫组化观察Hrd1的表达.体外培养的人皮肤成纤维细胞分为对照组、紫外线组、ATRA组及紫外线+ATRA组,紫外线组和ATRA+紫外线组照光前用磷酸盐缓冲液覆盖细胞上层,照射10 J/cm2 UVA或30 mJ/cm2 UVB,ATRA+紫外线组(照光后给药)和ATRA组用含ATRA 1 μmol/L的培养基继续培养24h.Western印迹法检测各组成纤维细胞Hrd1表达,荧光显微镜观察各组细胞内活性氧水平.组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD-t检验,P< 0.05认为差异有统计学意义.结果 30~ 40岁、60~ 70组曝光部位皮肤组织中Hrd1表达水平分别为0.307±0.256、0.486±0.579,均明显高于避光部位(0.196±0.330、0.199±0.375),t值分别为5.486、10.579,P<0.05.BALB/c小鼠体内实验中,对照组、紫外线组、ATRA组及紫外线+ATRA组小鼠皮肤中Hrd1表达水平分别为0.189±0.015、0.288±0.017、0.187±0.020、0.226±0.021,差异有统计学意义(F=19.553,P< 0.001),紫外线组高于对照组(t=5.337,P=0.033)和ATRA+紫外线组(t=4.891,P=0.039).体外实验中,人皮肤成纤维细胞分别经UVA、UVB照射后,4组细胞Hrd1水平差异均有统计学意义(F值分别为120.704、102.119,均P<0.001),UVA或UVB照射对Hrd1表达水平的影响基本一致,紫外线组Hrd1水平均明显高于对照组和ATRA+紫外线组(均P<0.05).紫外线照射后,紫外线组活性氧水平均明显高于对照组和ATRA+紫外线组(均P<0.05).结论 ATRA可以抑制紫外线介导的皮肤成纤维细胞中Hrd1的表达,其机制可能与ATRA抑制细胞内活性氧生成有关.
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Key words
Ultraviolet rays,Tretinoin,Fibroblasts,Skin aging,Ubiquitin-protein ligases,Reactive oxygen species,Hrd1
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