GM-CSF与LMP2A融合基因重组卡介苗的免疫学特性

目的对融合的粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（ gramulocyte-macrophase colony-stimu-latingfactor， GM-CSF）基因与EB病毒（Epstein-Barr virus）基因LMP2A进行鉴定并对rBCG进行免疫学特性研究。方法用免疫印迹法（ Western blot ）检测rBCG中融合基因表达；将表达融合基因的rBCG注射小鼠，用酶联免疫吸附试验（ ELISA）检测血清特异性抗体表达水平，乳酸脱氢酶法检测细胞免疫功能，观察rBCG的作用；建立小鼠EBV阳性的肿瘤模型并观察rBCG的治疗效果。结果 rBCG能分泌性表达目的蛋白，该目的蛋白能被GM-CSF抗体及LMP2 A抗体识别；ELISA结果显示rBCG能刺激小鼠产生相应抗体，注射小鼠的细菌数量为5×108个时，抗体最大滴度为1∶27900[（326．5±7．8） pg/ml]；rBCG组对EBV阳性胃癌细胞（GT39细胞）的杀伤率为（89．6±6．8）％，显著大于对照组（P＜0．05）。 PBS及BCG对照组的肿瘤体积明显大于rBCG治疗组，3组肿瘤体积分别为（1964．0±548．7） mm3、（1268．7±72．4） mm3、（168．6±78．8） mm3。结论 GM-CSF与LMP2A融合基因重组卡介苗成功表达目的蛋白，免疫小鼠后产生体液免疫和细胞免疫；rBCG能有效抑制小鼠体内的肿瘤生长。