核转录因子kappaB通路在血小板源性生长因子诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用

目的 探讨核转录因子kappaB(NF-κB)通路在血小板源性生长因子(PDGF)诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMC)增殖中的作用.方法 体外培养大鼠PASMC,随机分为3组:对照组(M199培养基培养)、PDGF刺激组(M199培养基与PDGF联合培养)、PDGF+小白菊内酯干预组(在M199培养基培养的基础上进行PDGF诱导,并予NF-κB抑制剂小白菊内酯干预).通过四唑盐(MTT)比色法和流式细胞术检测PASMC的增殖及细胞周期;通过免疫组织化学法检测NF-κB及其下游因子环氧化酶(COX-2)蛋白的表达并进行图像分析;通过荧光定量反转录-PCR检测NF-κB及COX-2 mRNA的表达;采用单因素方差分析进行统计处理,两两比较采用LSD法.结果 PDGF刺激组各时间点细胞MTT值均较对照组高(P均＜0.05),予NF-κB抑制剂小白菊内酯干预后,各时间点细胞MTT值均较PDGF刺激组明显降低(P均＜0.05);流式细胞术检测结果显示:PDGF刺激组S期和G2 +M期细胞比例较对照组增高(P＜0.05),予小白菊内酯干预后,S期和G2 +M期细胞比例较PDGF刺激组降低(P ＜0.05);PDGF刺激组NF-κB和COX-2蛋白及mRNA表达水平均明显高于对照组(P均＜0.05),予小白菊内酯干预后,NF-κB和COX-2的蛋白及mRNA表达水平较PDGF刺激组均下降(P均＜0.05).结论 PDGF能诱导PASMC增殖,促进细胞周期进程,增强NF-κB和COX-2蛋白及mRNA表达;NF-κB通路参与PDGF诱导PASMC的增殖过程.