姜黄素对脓毒症小鼠淋巴细胞凋亡的作用及机制研究

目的 研究姜黄素对脓毒症淋巴细胞凋亡的抑制作用,并探讨其机制.方法 本实验于温州医科大学遗传学实验教学中心完成.取180只清洁级BALB/c雄性小鼠,每次60只,按照随机数字法分成3组,即假手术组(n=20),脓毒症组(n=20),姜黄素组(n=20),实验重复3次.假手术组仅行开腹,不结扎穿孔;脓毒症组和姜黄素组行盲肠结扎加穿孔术(cecal ligation and puncture,CLP);姜黄素组术前灌胃姜黄素200 mg/ (kg·d),持续两周.术后24 h观察病死率,并取脾脏分离淋巴细胞.采用流式细胞术检测淋巴细胞凋亡情况与线粒体膜电位水平;Western blot检测CytC、Bax蛋白表达.数据采用SPSS 16.0软件进行分析,计数资料采用x2检验,计量资料采用单因素方差分析.结果 脓毒症组小鼠术后24 h病死率较假手术组明显升高(33.3％ vs.0.0％,P=0.000),姜黄素组病死率较脓毒症组明显降低(16.6％ vs.33.3％,P=0.035).脓毒症组脾淋巴细胞凋亡率为(41.2±3.8)％,较假手术组(8.0±1.7)％明显增高(P=0.000);与脓毒症组比较,姜黄素组淋巴细胞凋亡率(27.3±1.3)％明显下降(P=0.000).脓毒症组线粒体膜电位阳性的细胞百分率为(40.4±1.9)％,较假手术组(79.9±2.1)％明显降低(P =0.000),姜黄素组线粒体膜电位阳性细胞比率为(57.7±1.6)％,与脓毒症组比较膜电位水平明显升高(P=0.000).脓毒症组胞浆Cyt C蛋白、线粒体Bax蛋白表达水平较假手术组明显上调(P =0.000),而姜黄素组胞浆Cyt C蛋白(P =0.037)、线粒体Bax蛋白(P=0.000)水平都较脓毒症组明显降低.结论 姜黄素可明显减轻脓毒症状态下脾脏淋巴细胞凋亡,且这一作用可能是通过拮抗线粒体凋亡途径实现的.