Annexin V 纳米级超声造影剂的制备及体外靶向显像的实验研究

目的：探讨连接 Annexin V 纳米级超声造影剂的制备、超声显影及体外与肿瘤凋亡细胞的结合能力。方法采用薄膜水化法制备包裹医用全氟丙烷气体的纳米级脂质微泡,通过生物素-亲和素系统连接 Annexin V 分子,制成 Annexin V 纳米超声造影剂(Annexin V-Nanobubbles,AVNBs)；纳米粒径/电位分析仪检测 AVNBs 的粒径和 Zeta 电位；将 AVNBs 分别于4℃存放0 h、12 h、24 h、72 h 后测粒径,并分析其稳定性；扫描电子显微镜观察其形态及均一度；超声成像系统检测其体外显影效果,并与声诺维进行对比；荧光显微镜观察 AVNBs 与体外肿瘤凋亡细胞的结合情况。结果测得 AVNBs 粒径大小为(640.2±32.1)nm,Zeta 电位为(-23.30±5.71)mV,且24 h 内粒径基本稳定在纳米级；肉眼观察制备好的AVNBs 为乳白色混悬液。扫描电镜视野下呈空心球形、大小均一、分散良好。体外超声成像显示,AVNBs与对照组声诺维有相同的显影效果。体外实验证实 AVNBs 与凋亡细胞结合良好,结合率为(97.55±1.30)%。结论本法制备的 AVNBs 粒径小,稳定性和均一性好,体外超声显影效果明显,可与体外凋亡细胞靶向性结合。