肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体单克隆抗体对人肾癌细胞的毒性作用

目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体(TRAIL-R)的单克隆抗体对肾癌细胞的毒性作用和机制.方法在人肾癌细胞系ACHN和Caki-1中,应用四甲基偶氮唑盐(MTT)方法分析细胞毒效应,应用流式细胞术检测相关凋亡诱导配体受体(TRAIL-R)的表达,应用荧光染色和Annexin V标记检测细胞凋亡的发生,应用比色法分析多种Caspase活性在凋亡过程中的变化.结果抗TRAIL-R2单克隆抗体(ETR2)对人肾癌细胞系ACHN和Caki-1都具有明显的细胞毒性(P＜0.01),而抗TRAIL-R1单克隆抗体(ETR1)的细胞毒性不显著(P＞0.05).TRAIL-R2在两种细胞表面均高表达(ACHN:97.9%,Caki-1:98.7%),TRAIL-R1表达微弱(ACHN:7.6%,Caki-1:7.54%).ETR2通过诱导细胞凋亡发挥细胞毒作用,Caspase-8,-9,-6和-3活性在凋亡过程中明显增高(P＜0.01).结论TRAIL-R2的单克隆抗体在体外可诱导肾癌细胞发生凋亡,其细胞毒性与TRAIL-R2的表达有关,在凋亡过程中内源性与外源性凋亡通路均被激活.