EdU掺入法研究炎症状态下小鼠骨髓粒系的增殖

目的 通过小鼠腹腔注射5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷 (5-ethynyl-2′-deoxyuridine, EdU)标记骨髓中处于增殖状态的粒细胞,以期了解炎症状态下小鼠骨髓中的不同分化阶段的粒细胞生成的变化.方法 小鼠腹腔注射热灭活的大肠杆菌(HI E.coli)建立急性腹腔炎症模型,采用EdU掺入法,随后24、48、72、96 h将小鼠处死并取小鼠全骨髓细胞,应用流式抗体 lineage、CD34、c-Kit、Ly6G标记粒细胞谱系中的原始粒细胞、早幼粒细胞、中幼粒细胞、晚幼粒细胞以及杆状和分叶核细胞,瑞氏染色观察五群细胞的形态,结合EdU标记,明确炎症状态下不同分化阶段粒细胞的增殖水平的变化.结果 小鼠腹腔注射HI E.coli 24、48、72、96 h后,与生理状态下相比,急性炎症状态下原始粒细胞EdU阳性细胞数目在24 h增加了10.0%,在48 h和72 h分别降低了75.0%和23.0%.早幼粒细胞EdU阳性细胞数目在24、48、72、96 h呈现下降的趋势,分别下降了23.0%、54.5%、64.3%和77.8%.中幼粒细胞的EdU阳性细胞数目在24、48 h之间呈现增加的趋势,分别增加了60.0%和10.0%,在72、96 h呈现下降的趋势,分别下降了80.0%和90.0%.晚幼粒细胞EdU的阳性细胞数目在24 h增加了50.0%,在48、72、96 h之间呈现下降的趋势,分别降低了33.3%、61.5%和66.7%.杆状和分叶核粒细胞EdU的阳性细胞数目在24 h增加了14.0%,在48、72、96 h呈现降低的趋势,分别下降了50.0%、77.8%和88.0%.结论 在建立的HI E.coli诱导的急性腹膜炎模型发生24 h后,出现典型的急性髓系造血,即粒系前体细胞增殖加快,以中幼粒细胞以及晚幼粒细胞为主,导致成熟中性粒数目增多,可能多为趋化至炎症部位的成熟粒细胞.