脐血单个核细胞移植对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠星形胶质细胞增生的影响及其与骨形成蛋白4的相关性研究

目的 探讨脐血单个核细胞(UCBMC)移植对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠星形胶质细胞增生的影响及其与骨形成蛋白(BMP)4的相关性.方法 40只7日龄健康SD新生大鼠采用随机数字表法分为正常对照(CON)组、缺氧缺血(HI)组、正常+UCBMC(N+UCBMC)组、HI+ UCBMC组,每组10只.采用经典的Rice法制成HIBD模型,HI+ UCBMC组与N+UCBMC组于缺氧结束后24h于损伤侧侧脑室注入3×106个UCBMC,移植后7d,采用尼氏染色法观察损伤侧神经元形态及数目的变化,Western blot法检测胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达水平,采用增殖细胞核抗原(PCNA)/GFAP及BMP4/GFAP免疫荧光双标法观察HIBD大鼠星形胶质细胞增生情况.结果 尼氏染色显示HI组大脑皮质及海马处神经元均排列不规则,数量较少,显著少于CON组(t皮质=26.54、t海马=32.26,P＜0.05);HI+ UCBMC组神经元排列较规则,数量较多,显著高于HI组(t皮质=10.18、t海马=12.56,P＜0.05);Western blot示HI组GFAP表达量明显高于CON组(t=5.50,P＜0.05);HI+ UCBMC组GFAP表达量明显低于HI组(=3.04,P＜0.05);免疫荧光示HI组PCNA+ GFAP+细胞,显著高于CON组(t=10.39,P＜0.05);HI+ UCBMC组PCNA+GFAP+细胞显著少于HI组(=3.72,P＜0.05);HI组BMP4+细胞显著高于CON组(t=5.52,P＜0.05);HI+UCBMC组BMP4+细胞显著少于HI组(=2.33,P＜0.05),GFAP与BMP4荧光强度分析显示二者呈正相关(r=0.84,P＜0.05).结论 UCBMC侧脑室移植可减少HI大鼠星形胶质细胞的增生,促进脑损伤的修复,具有神经保护作用,其机制与BMP4表达降低有关.