5-氟尿嘧啶对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖与凋亡机制影响的初步探讨

目的 拟观察5-氟尿嘧啶对瘢痕疙瘩成纤维细胞Smad7和β转化生长因子(transforming growth factor-6,TGF-β)Ⅰ型受体以及细胞凋亡相关基因Bcl-2和Bax蛋白表达的影响.方法 (1)瘢痕疙瘩组织成纤维细胞原代培养,取4～6代传代细胞加入5个不同浓度(10,20,40,80,160μmol/L)5-氟尿嘧啶干预24,48,72 h.(2)利用四甲基偶氮唑盐法(MTT)测定瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖能力.(3)应用蛋白免疫印迹法(Western-blot)检测各组搬痕疙瘩成纤维细胞中Smad7和TGF-βⅠ型受体的表达及对Bcl-2、Bax蛋白表达的影响.结果 (1)MTT实验中,当5-氟尿嘧啶浓度为10,20 μmol/L作用24 h时,未发现成纤维细胞死亡,与空白对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05);其他浓度下作用各组成纤维细胞死亡现象差异均有统计学意义(P＜0.01).(2)免疫印迹法实验结果如下:①与空白对照组相比,TGF-β1组Smad7表达明显减弱,TGF-βⅠ型受体表达则显著增强,差异有统计学意义(P＜0.01).②加入5-氟尿嘧啶干预后可显著增强Smad7的表达,差异有统计学意义(P＜0.01).③经不同浓度5-氟尿嘧啶干预后,实验组Bcl-2蛋白表达均低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).但实验组Bax蛋白表达均高于对照组(P＜0.05),TGF-βⅠ型受体表达无明显影响,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 5-氟尿嘧啶对瘢痕疙瘩成纤维细胞具有抑制增殖和诱导凋亡的作用.