苜蓿根腐病菌(Fusarium solani)的LAMP快速检测方法

Cheng-zhong LAN,Hong-chun RUAN,Lin GAN,Yu-li DAI,Xue-song LU

Guangdong Agricultural Sciences（2020）

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摘要

通过比较茄镰刀菌(Fusarium solani)与其近缘种之间的TEF-1α(translation elongation factor-1 al-pha)基因序列差异,设计并筛选出一套对茄镰刀菌具有种特异性的LAMP引物,建立了检测苜蓿根腐病菌的环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术体系,并进行了特异性和灵敏度验证.该方法在64℃等温条件下进行核酸扩增反应60 min,即可肉眼根据反应液颜色变化判定扩增产物.在特异性实验中,仅茄镰刀菌的DNA在检测后呈绿色的阳性反应,而其它供试菌株的DNA均呈橙色的阴性反应.该方法对目标病菌DNA的最低检测限为10 fg/μL,同时还可检测出苜蓿发病组织中的目标菌,因此,该方法具有快速、准确和灵敏的优点.

关键词

fusarium solani,isothermal amplification,rapid detection method,rapid detection,loop-mediated

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