微小RNA145对人脐静脉血管内皮细胞增殖迁移的影响

Chinese journal of experimental surgery(2013)

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摘要
目的 观察微小RNA145 (miR145)对人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)增殖和迁移能力的影响.方法 转染miR145模拟物和阴性对照序列进入人脐静脉内皮细胞(HUVECs)细胞,采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测转染后HUVECs细胞的增殖能力,Transwell小室检测转染后HUVECs细胞的迁移能力.用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测miR145候选靶基因去整合素-金属蛋白酶17(ADAM17)的mRNA表达水平,Westem blot检测ADAM17蛋白的表达水平.结果 转染48 h后,转染miR145模拟物组的吸光度(A)值(0.34±0.01)明显低于阴性对照组A值(0.44 ±0.01,P<0.01);转染72 h后,转染miR145模拟物组的A值(0.60±0.09)也显著低于阴性对照组A值(0.86±0.05,P<0.01).转染miR145组的细胞迁移穿过Transwell小室膜的细胞数[(135±6)个]明显少于阴性对照组穿过小室膜的细胞数[(205±30)个,P<0.05].转染miR145模拟物组的ADAM17的mRNA和蛋白水平均呈现下调,Real-time PCR的相对值为0.34 ±0.15(P<0.01);Western blot灰度值为0.65±0.21(P <0.05).结论 miR145能够显著抑制HUVECs的增殖和迁移能力,且miR145可能通过ADAM17实现调控血管内皮细胞增殖和迁移功能.
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关键词
microRNA145,Umbilical vein endothelial cells,Proliferation,Migration,Tumor angiogenesis
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