EGR1对HTLV-1病毒感染后宿主细胞自噬的影响

目的 探讨早期生长反应基因1(EGR1)对成人T淋巴细胞白血病病毒1型(HTLV-1)感染后宿主细胞自噬的影响.方法 获得病毒早期感染模型,免疫印迹检测病毒核心蛋白p19、宿主细胞EGR1的表达;荧光素酶报告基因检测EGR1的5′端调控序列转录活性;筛选有效的EGR1 siRNA,将EGR1 siRNA转染HeLa细胞,随后HTLV-1病毒阳性细胞系MT2与HeLa细胞进行共培养,免疫印迹检测病毒核心蛋白p19、EGR1、自噬相关蛋白LC3;real-time PCR检测病毒载量;免疫荧光检测自噬体数目.结果 共培养后,宿主细胞EGR1蛋白表达和调控序列荧光素酶活性逐渐增强,且EGR1蛋白的表达与细胞自噬水平呈现正相关;筛选了有效的EGR1 siRNA,命名为siE2;共培养模型干扰EGR1的表达后,病毒核酸载量、核心蛋白p19的表达以及自噬相关蛋白LC3B/LC3A比例均下调,同时伴有胞内自噬体数目的减少(P<0.01).结论 EGR1与HTLV-1感染后宿主细胞自噬水平和病毒复制密切相关.