Fasudil 对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠模型巨噬细胞的免疫调节作用研究

目的：探讨Fasudil（法舒地尔）介导的细胞治疗对实验性自身免疫性脑脊髓炎（ exper-imental autoimmune encephalomyelitis， EAE）巨噬细胞的免疫调节作用。方法雌性C57BL／6小鼠，采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55（MOG35-55）诱导建立主动免疫EAE模型，免疫后第9天制备脾脏单个核细胞（ MNCs），在添加／或无Fasudil条件下体外培养。72 h后收集上述细胞，应用流式细胞术检测巨噬细胞亚群的变化，Griess法检测NO含量，ELISA法检测Arg-1水平；并以5×107个细胞／只小鼠腹腔注射诱导建立被动转移EAE模型，分为PBS-MNCs组和Fasudil-MNCs组，观察各组小鼠临床评分和体重变化。结果主动免疫第9天EAE小鼠脾脏MNCs可诱导被动转移EAE模型的建立，而体外Fasudil处理72 h的MNCs可影响EAE的发生、发展。体外实验显示，Fasudil可部分逆转M1表型至M2表型，即M1型标志CD16／32、iNOS、IL-12降低，而M2型标志CD206、IL-10、CD23升高。 Fasudil还可抑制NO产生，促进Arg-1分泌。结论 Fasudil通过转化炎性M1型巨噬细胞为抗炎的M2型巨噬细胞影响EAE的发生、发展。