下调mTOR基因表达对人肝癌细胞SMMC-7721热疗增敏效应的影响

目的 观察下调哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)基因表达对人肝癌细胞SMMC-7721热疗敏感性的影响并初步探讨其作用机制.方法 通过脂质体介导mTOR反义真核表达载体转染SMMC-7721细胞,分别采用RT-PCR和Western blot技术检测转染后mTOR基因mRNA及蛋白表达.SMMC-7721细胞经转染后给予热疗处理,采用CCK-8法检测细胞增殖活性,采用平板克隆实验检测克隆形成率,采用细胞划痕实验检测迁移能力,采用流式细胞仪检测细胞凋亡及周期变化情况.结果 SMMC-7721细胞转染后其mTOR基因mRNA表达(0.23±0.01)及蛋白表达(0.31±0.02)均明显降低(P＜0.05),提示反义载体能有效下调SMMC-7721细胞mTOR基因表达.SMMC-7721细胞经转染后给予热疗处理,发现细胞增殖活性、克隆形成能力及细胞迁移能力均明显降低(P＜0.05).通过流式细胞仪检测发现,实验组SMMC-7721细胞经热疗后其凋亡率[(52.27±3.72)％]较阴性对照组凋亡率[(28.93±2.51)％]明显增高,其细胞周期呈现S期比例增加(P＜0.05)及生长阻滞现象.结论 下调mTOR基因表达能提高人肝癌细胞SMMC-7721的热疗敏感性,其作用机制可能与诱导细胞凋亡及S期生长阻滞有关.