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环状RNA hsa_circ_0031739与2型糖尿病关系的初步研究

Chinese Journal of Laboratory Medicine(2018)

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Abstract
目的 筛选高糖处理人脐静脉内皮细胞中差异表达环状RNA,分别在细胞模型中和2型糖尿患者外周血中进行验证,为探索2型糖尿病的生物学诊断标志物奠定基础.方法 以脐静脉内皮细胞作为实验模型,设置对照组(n=3)与高糖组(n=3),分别使用正糖(5.5 mmol/L)及高糖(30.0 mmol/L)条件进行处理,运用高通量测序技术初步筛选差异表达环状RNA.通过PCR和实时定量PCR(q-PCR)技术,在内皮细胞模型中对差异表达环状RNA进行验证.随后,在2型糖尿患者外周血(n=32)及正常人外周血(n=28)中,进一步验证上述差异表达环状RNA.运用t-检验、相关性分析和ROC曲线,对实验结果进行分析.结果 高通量测序共筛选出1087个差异表达环状RNA,其中554个上调,533个下调.从中挑选出6个上调环状RNA在脐静脉内皮细胞模型中初步验证,发现,PCR结果及q-PCR结果与测序结果基本一致.再从中挑选出3个上调最为明显的环状RNA在外周血中进一步验证.本研究发现,环状hsa_circ_0031739在外周血样本中的差异表达也具有统计学意义(0.015±0.0025 vs.0.006±0.0013,P=0.0059<0.05),ROC曲线下面积为0.730,并且与血糖和糖化血红蛋白水平正相关(r=0.317,P=0.0137<0.05;r=0.348,P=0.0064<0.05).结论 人脐静脉内皮细胞作为糖尿病研究中常用的细胞模型,高糖处理后存在差异表达环状RNA谱.环状RNA hsa_circ_0031739在细胞模型和2型糖尿病外周血样本中的差异表达均具有统计学意义,与血糖及糖化血红蛋白相关,具有一定的诊断意义.因此,环状RNA hsa_circ_0031739有望成为糖尿病新型生物学诊断标志物,有助于2型糖尿病的综合诊断和疾病机理研究.
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Key words
Diabetes mellitus,type 2,RNA,Biomarkers,High-throughput nucleotide sequencing
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