膜联蛋白A1调控膀胱癌细胞增殖、凋亡及迁移的机制

目的 探讨膜联蛋白A1(ANXA1)在膀胱癌细胞增殖、凋亡和迁移中的作用及调控机制.方法 2018年2月至2019年6月,以膀胱癌T24细胞为模型,取对数生长期的T24细胞进行转染,根据转染的质粒将细胞分为过表达对照组(ctrl组,转染pLV-Ctrl)、ANXA1过表达组(ANXA1组,转染ANXA1-OE)、敲降对照组(shctrl组,转染pLL3.7-shCtrl)、ANXA1敲降组1(shANXA1-1组,转染ANXA1-sh1)、ANXA1敲降组2(shANXA1-2组,转染ANXA1-sh2)和ANXA1敲降组3(shANXA1-3组,转染ANXA1-sh3),转染24h后收集细胞用于实验.采用荧光定量PCR法检测ANXA1的mRNA表达水平;采用CCK-8法检测细胞的活性;采用流式细胞术检测细胞凋亡和周期;采用Transwell法检测细胞的迁移情况.结果 荧光定量PCR检测结果显示,ANXA1组和ctrl组的ANXA1表达量分别为15 369.00±874.20和1.00±0.07,差异有统计学意义(P ＜0.001);shANXA1-2组、shANXA1-3组、shctrl组的ANXA1表达量分别为0.51±0.04、0.51±0.02、1.00±0.04,差异有统计学意义(P＜0.001).ANXA1组和ctrl组的细胞活性分别为2.04±0.02和1.61±0.01,差异有统计学意义(P＜0.001);shANXA 1-2组、shANXA1-3组、shctrl组的细胞活性分别为1.40±0.002、1.31±0.003、1.73±0.01,差异有统计学意义(P＜0.001).流式细胞检测结果显示,ANXA1组和ctrl组G0/G1期细胞数量分别为28.14±0.33和46.19±0.73,差异有统计学意义(P＜0.001),shANXA1-2组、shANXA1-3组、shctrl组的G0/G1期细胞数量分别为58.67±0.49、62.34±4.01、45.59±0.19,shANXA1-2组、shANXA1-3组与shctrl组比较差异均有统计学意义(P＜0.001,P＜0.05).ANXA1组和ctrl组细胞凋亡率差异无统计学意义(P＞0.05),而shANXA 1-2组、shANXA1-3组、shctrl组的细胞凋亡率分别为13.04％、14.58％、7.76％,差异有统计学意义(P＜0.001).细胞功能实验结果显示,ANXA1组和ctrl组迁移细胞数量分别为(525.00±9.30)个和(385.70±13.40)个,差异有统计学意义(P＜0.01),shANXA 1-2组、shANXA1-3组、shctrl组迁移细胞数量分别为(214.70±6.40)、(226.00±5.30)、(398.70±10.00)个,差异有统计学意义(P ＜0.001).结论 ANXA1过表达可显著促进膀胱癌T24细胞增殖和迁移,抑制细胞凋亡;敲降ANXA1可抑制Tr24细胞的增殖和迁移,促进细胞凋亡.